培養(yǎng)基是用來供給細(xì)胞營養(yǎng),促使細(xì)胞增殖的,也是細(xì)胞賴以生長的環(huán)境。細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中用量多的就是細(xì)胞培養(yǎng)基,雖然細(xì)胞培養(yǎng)試驗(yàn)基本技術(shù)大同小異,但是每種細(xì)胞的培養(yǎng)條件卻相差甚遠(yuǎn)。若偏離某種細(xì)胞所需的培養(yǎng)條件,則會導(dǎo)致細(xì)胞表達(dá)不同的表型。
培養(yǎng)基種類
按照來源分類:在動物細(xì)胞體外培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中,可使用天然培養(yǎng)基(Natural Medium)或是合成培養(yǎng)基(Synthetic/Artificial Medium)。
天然培養(yǎng)基:源于動物體液或組織分離提取,營養(yǎng)成分豐富且各項(xiàng)條件與體內(nèi)環(huán)境相似,所以培養(yǎng)效果佳,但是由于來源于動物,成分復(fù)雜,且批間差較大。
合成培養(yǎng)基:是由高純度化學(xué)成分(無機(jī)鹽、氨基酸、維生素、含碳物質(zhì)等)與純水配置而成,所有成分都是確定,且可知其確切含量的。
合成培養(yǎng)基根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康挠挚煞譃槿N:
短時(shí)間保存細(xì)胞活性
即各類平衡鹽溶液,具有特定的pH和滲透壓;能維持細(xì)胞離開生物體后幾小時(shí)內(nèi)的活性。
延長細(xì)胞存活時(shí)間
即基礎(chǔ)培養(yǎng)基,在平衡鹽溶液中添加各種有機(jī)化合物或血清,配合適當(dāng)?shù)膶?shí)驗(yàn)操作條件,可將細(xì)胞培養(yǎng)至多代。
特殊功能
即特殊培養(yǎng)基,根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康?誘導(dǎo)分化、增殖等要求,將基礎(chǔ)培養(yǎng)基額外添加各類因子的特殊培養(yǎng)基。
目前市面上合成培養(yǎng)基種類繁多且使用便利,因此合成培養(yǎng)基目前是使用zui廣泛的。
合成培養(yǎng)基成分與功能
培養(yǎng)基一般含有氨基酸、無機(jī)鹽、維生素、含碳物質(zhì)和其他營養(yǎng)元素,每種成分對于細(xì)胞存活、代謝等功能都有不同影響,不同細(xì)胞系需要的成分含量也不同,因此市面上會存在各類培養(yǎng)基配方。
培養(yǎng)基形式不同,儲存體積、價(jià)格、使用方式也各不相同。
培養(yǎng)基的選擇
培養(yǎng)基的選擇影響著細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)的成功與否,不同細(xì)胞有著不同的特異性生長要求。
因此,我們需要通過文獻(xiàn)閱讀及實(shí)驗(yàn)確定細(xì)胞的培養(yǎng)基。