蛋白質沉淀方法之有機溶劑沉淀法
點擊次數:106 更新時間:2024-11-28
有機溶劑沉淀法多用于生物小分子、多糖及核酸產品的分離純化
有機溶劑的沉淀機理是降低水的介電常數,導致具有表面水層的生物大分子脫水,相互聚集,最后析出。
該法優點在于:
1)分辨能力比鹽析法高,即蛋白質或其它溶劑只在一個比較窄的有機溶劑濃度下沉淀;
2)沉淀不用脫鹽,過濾較為容易;
3)在生化制備中應用比鹽析法廣泛。
但是,在常溫下,有機溶劑沉淀蛋白質往往引起變性。例如酒精消毒滅菌就是如此。因此,操作要求在低溫下進行。有機溶劑的選擇首先是能和水混溶,使用較多的有機溶劑是乙醇、甲醇、丙酮,還有二甲基甲酰胺、二甲基亞砜、乙腈和2-甲基-2,4戊二醇等。